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- 產(chǎn)品名稱： Bst DNA Polymerase Large Fragment
- 產(chǎn)品貨號： CSPC0820
- 貨期： 現(xiàn)貨
- 價(jià)格與訂購： 1500
- 數(shù)量：
庫存： 100
- 規(guī)格： 8KU
- 產(chǎn)品信息
- 如何訂購
產(chǎn)品概述
Bst DNA Polymerase Large Fragment是Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的一部分，具有 5'→3' DNA聚合酶活性，以及很強(qiáng)的鏈置換活性，但缺失5'→3'核酸外切酶活性。Bst DNA Polymerase Large Fragment可用于等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)，如LAMP(Loop-mediated isothermal amplification)，RCA(Rolling-circle amplification)等。
產(chǎn)品組分
| 組 分 | CSPC0820 (8,000 U) |
| Bst DNA Polymerase Large Fragmenta(8 U/μl) | 1 ml |
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a. 貯存于10 mM Tris-HCl pH 7.5，50 mM KCl，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，0.1% Triton X-100，50% 甘油。
保存條件
-30 ~ -15℃保存，≤0℃運(yùn)輸。
適用范圍
本產(chǎn)品適用于LAMP，HDA，RCA等多種等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)。
單位定義
65℃、30 min內(nèi)使10 nmol的dNTP摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量，定義為1個(gè)活性單位(U)。
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品不可用于PCR反應(yīng)。
2. 本產(chǎn)品使用溫度不超過70℃。
注意事項(xiàng)
1. 在使用本品進(jìn)行RNA樣品中DNA的清除實(shí)驗(yàn)時(shí)，可在反應(yīng)體系中添加Murine RNase Inhibitor以保護(hù)RNA不被降解。
2. 部分實(shí)驗(yàn)條件下，DNaseⅠ的最佳使用量需要通過實(shí)驗(yàn)進(jìn)行調(diào)整。
3. 失活或抑制：加入終濃度為5 mM的EDTA并經(jīng)過65℃加熱10 min，或通過酚氯仿抽提可使DNaseⅠ失活。此外，使用金屬離子螯合劑， 達(dá)到毫摩爾/升濃度的鋅離子，0.1%的SDS，DTT、巰基乙醇等還原劑，50 - 100 mM以上鹽濃度均對DNaseⅠ的活性有顯著抑制作用。
常見問題及解決方案
1.環(huán)介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增引物如何設(shè)計(jì)及篩選？
環(huán)介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增引物的設(shè)計(jì)請參考http://primerexplorer.jp/e/，建議使用V4版本。
具體操作手冊登錄 下載。環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增引物的初步篩選可參照操作手冊，具體需要
通過實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證最佳引物。
2.環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增產(chǎn)物可以做酶切鑒定嗎？
可以。但是開蓋容易造成氣溶膠污染，一定要謹(jǐn)慎操作。
3.加環(huán)引物出現(xiàn)假陽性，不加就正常，是什么原因？
若環(huán)引物經(jīng)驗(yàn)證沒有污染，則可能是環(huán)引物導(dǎo)致了非特異的擴(kuò)增，這種情況下建議不使用環(huán)引物或者更換別的環(huán)引物。
Note
For research use only .
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